浙江农林大学林木遗传育种学、森林培育、野生动植物保护与利用专业硕士研究生入学考试

    植物细胞与基因工程考试大纲

    本《植物细胞与基因工程》考试大纲适用于浙江农林大学林木遗传育种学、遗传学硕士学位的研究生入学考试。主要内容包括植物基因工程和植物细胞工程两大部分，要求考生能够了解植物细胞与基因工程各研究领域中常用的技术手段，包括植物细胞与组织培养技术、细胞融合技术、基因工程的基本操作技术、PCR技术以及植物细胞与基因工程相结合的以基因转移技术为核心的植物基因转移技术等相关知识，并具有综合运用所学知识分析问题和解决问题的能力。试卷满分为100分，考试时间为120分钟。

    考试内容

    第一章绪论部分

    基本要求：要求学生大体了解基因工程的发展史、基因工程的研究内容和基因工程的应用范围。

    第一节：基因研究的发展历史，基因工程的诞生

    简要介绍基因研究发展理论上的三个重要发现，技术上的三个重要成果

    第二节：研究内容：

    基因工程的概念，以及基因工程的研究内容。

    第三节：基因工程的应用

    基因工程已在医药业、农牧业、食品工业、环境保护、能源开发领域得到了广泛的应用，本节着重介绍基因工程在这些方面的应用。

    重点：基因工程的研究内容，以及基因工程的应用

    难点：基因工程的研究内容，以及基因工程的应用

    第二章：基因工程的基本操作程序

    基本要求：要求学生掌握基因工程的五个方面基本操作程序，对基因工程有初步了解。

    第一节：带有目的基因的DNA片段的制备

    介绍来自真核生物和原核生物的目的基因的DNA片段制备的方法（ｃDNA法，限制酶法，PCR方法，物理法以及人工合成法等）以及植物目的基因克隆的新策略。

    第二节：DNA片段与载体DNA体外重组

    使用某种方法将DNA分子进行剪切，然后进行两种DNA分子的连接。

    第三节：DNA重组体转入受体细胞

    利用化学法或电击法将重组体导入大肠杆菌感受态细胞中。

    第四节：重组体克隆的筛选与鉴定

    重组体克隆的筛选与鉴定的方法较多，本节只介绍两种常用的方法（表型直接筛选法和菌落或噬菌斑原位杂交。

    第五节：外源基因的表达

    外源基因的表达是基因操作过程的重要组成部分。成功的表达是基因工程操作的目的，外源基因在表达体系中，既能保持原来的生物活性又能高效地产生蛋白产物。

    重点：基因工程的基本操作程序

    难点：带有目的基因的DNA片段的克隆以及外源基因的表达。

    第三章基因工程的工具酶

    基本要求：要求学生了解基因工程中工具酶的特点特性、以及应用

    第一节：基因工程工具酶的概念

    第二节：基因工程工具酶的分类，性质

    根据工具酶的功能将工具酶分为三种不同的类型，剪切酶，修饰酶和连接酶，分别介绍其性质。

    第三节：限制性核酸内切酶的性质及其应用

    限制性核酸内切酶在基因工程的操作中使用的较多，所以该节重点介绍其性质及其应用。

    第四节修饰酶

    聚合酶、碱性磷酸酶和甲基化酶

    第五节连接酶

    连接酶的种类、连接酶的反应条件、连接酶的影响因素

    重点：基因工程工具酶的限制性内切酶II的特点和应用，修饰酶和连接酶的特点和应用

    难点：基因工程工具酶的性质和在基因工程中的应用

    第四章基因工程载体

    基本要求：要求学生了解和掌握基因工程载体的要求，特性，以及如何选择基因工程的载体。

    第一节：基因工程载体的概念及其分类，

    简要介绍基因工程所用载体的概念，以及分类情况，如质粒载体、噬菌体载体等。

    第二节：各种不同的基因工程载体的特性及其应用

    针对不同的基因工程载体进行分别讲解，将载体的特性，及其在基因工程中的应用一一介绍。

    重点：基因各种不同的基因工程载体的特性

    难点：如何选择基因工程的载体

    第五章聚合酶链式反应(PCR)

    基本要求：要求学生了解和掌握PCR相关技术以及应用。

    第一节：PCR的原理

    第二节：PCR的种类

    根据不同的目的，对PCR进行分类，

    第三节：应用PCR时的注意事项

    第四节：PCR在各个领域的应用

    现你分子生物学发展很快，PCR的应用范围很广泛，如医学界、法医、农作物的应用以及植物的育种方面等。

    重点：PCR的原理和种类

    难点：PCR应用时应注意的事项以及如何应用PCR

    第六章分子标记技术

    基本要求：要求学生掌握分子标记技术的相关原理和应用

    第一节：分子标记的基本原理

    第二节：分子标记的类型

    第三节：新型分子标记的开发和应用

    第四节：分子标记的应用

    重点：分子标记的开发和应用

    难点：选择分子标记应注意的事项

    第七章植物基因工程

    基本要求：要求学生了解和掌握植物基因转化的方法以及植物基因工程的应用和发展

    第一节根瘤农杆菌及其转化体系

    系统介绍根瘤农杆菌及其转化体系。

    第二节　基因的导入方法

    介绍基因转化的各种不同的方法如基因枪转化，农杆菌介导的基因转化，

    第三节　转基因植物的鉴定

    表型鉴定，分子鉴定和蛋白质鉴定。

    第四节　植物基因工程的应用与展望

    重点：植物基因导入的方法和转基因植物的鉴定方法

    难点：根癌农杆菌及其转化体系的特点和性质

    第八章细胞融合技术

    基本要求：了解细胞融合的基本原理和融合材料的制备，细胞融合技术，单克隆抗体的生产以及新物种的培育。

    第一节细胞融合的基本原理和融合材料的制备。

    第二节细胞融合技术及影响因素。

    第三节融合细胞的选择。

    第四节单克隆抗体的生产以及新物种的培育。

    第五节细胞融合技术的进展与展望。

    重点：细胞融合技术，单克隆抗体的生产以及新物种的培育。

    难点：细胞融合技术的进展与展望。

    第九章植物细胞培养技术

    基本要求：了解植物组织与细胞培养的区别与发展历程；植物细胞培养，包括方法、应用、生物反应器培养、固定化培养以及存在的问题等，并从列举的植物中了解植物细胞培养技术在实际的应用。

    第一节简介植物组织与细胞培养的区别与发展历程。

    第二节植物细胞培养，包括方法、应用、生物反应器培养、固定化培养以及存在的问题等

    第三节植物单细胞培养，包括单细胞的制备、单细胞培养方法、植物细胞大规模悬浮培养、。

    第四节应用举例，列举商品化的细胞大规模培养的植物的研究

    重点：植物细胞培养技术，包括方法、应用、生物反应器培养、固定化培养以及存在的问题等。包括原生质体的制备、培养、发育和植株再生等。

    难点：植物单细胞制备、培养、发育和植株再生等。

    参考书（书名，编著者，出版社，出版时间,自编教材需有文字材料）

    《基因工程原理与应用》陈宏主编中国农业出版社2004

    《植物细胞工程原理与技术》周维燕主编，中国农业出版社，

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