2021湖南师范大学基因工程研究生考试大纲
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2021湖南师范大学基因工程研究生考试大纲 正文
湖南师范大学硕士研究生入学考试自命题科目考试大纲考试科目代码:复试笔试科目 考试科目名称: 基因工程
一、考试内容及要点
第一章 基因工程概述
基因工程的基本概念,基因工程的基本流程,基因工程诞生的标志,基因工程有哪些主要应用?
第二章 基因工程的工具酶
基因工程的工具酶有哪些?限制性内切核酸酶的特点,同尾酶与同裂酶的概念,DNA聚合酶和Klenow大片段的作用,DNA连接酶的作用, 碱性磷酸酶的作用及用途,末端脱氧核苷酸转移酶的作用,一步克隆法的原理等。
第三章 基因工程的载体
基因工程载体的概念及必须满足的基本条件,质粒载体的主要特征与基本结构,λ噬菌体载体的携带能力,COS位点的作用,克隆载体的概念,人工微小染色体的概念,质粒载体的标记基因的种类。什么是α互补?表达载体的概念与基本结构,T7噬菌体启动子系统的组成、融合蛋白表达系统的概念与载体结构,真核表达系统的载体组成等。
第四章 目的基因的获取与制备
1.基因文库
基因组文库的概念,基因组文库的构建方法, cDNA文库的概念和构建流程,构建cDNA文库需要用到哪些工具酶,合成cDNA第二条链有哪些方法,基因文库的载体类型等。
2.PCR技术
PCR技术的基本原理,PCR反应体系的主要成分,PCR反应主要程序。逆转录PCR、反向PCR、多重PCR及荧光定量PCR的概念与原理,Ct值的概念。
3.蛋白质工程
蛋白质工程的概念,PCR介导定点突变的原理。
第五章 目的基因转入受体细胞的方法
目的基因转入大肠杆菌细胞的方法,感受态细胞的概念。目的基因转入植物细胞的方法,花粉管诱导法的概念,基因枪法的概念,Ti质粒的结构,T-DNA的作用,双元载体的组成,Ti质粒介导外源基因导入植物细胞的机制。显微注射法的概念,逆转录病毒介导法的概念,精子载体法,体细胞克隆法的概念。
第六章 目的基因重组子的鉴定
核酸分子杂交的概念,探针的类型与标记方法。Southern杂交、Northern杂交、Western杂交及菌落(嗜菌斑)原位杂交的基本原理以及三者之间的比较。末端终止法DNA测序的基本原理, DNA自动测序的基本原理,二代DNA测序的类型,焦磷酸测序的原理,Solexa测序的原理,单细胞测序的原理。
第七章 基因工程在基因功能研究中的应用
1.基因表达谱的研究
胚胎原位杂交的概念,基因芯片的概念与类型,基因芯片的流程与应用。
2. 基因突变与基因敲除
转座子诱变的原理与优点,基因敲除的概念与流程,条件基因敲除的原理与优点,Cre酶的作用方式,LoxP序列的作用,RNA干扰的概念与分子机制,RNA干扰的优点与应用。TALEN打靶技术的原理和优点,DNA断裂修复的类型,CRISPR的概念,CRISPR基因编辑的原理,CRISPR基因编辑的应用。
3.基因的相互作用研究
凝胶迁移阻滞实验的原理与应用,染色质免疫沉淀的原理与应用,酵母双杂交系统的原理与应用,免疫共沉淀的原理等。
第八章 转基因植物
1.转基因植物的制备
外源基因导入植物的方法, Ti质粒的结构特点, Ti质粒介导植物基因转移的过程。
2.转基因植物的现状
抗虫转基因植物的概念,抗除草剂转基因作物的概念。植物生物反应器的概念。转基因生物的安全性和主要影响因素等。
第九章 转基因动物
转基因动物的概念,显微注射法制备转基因动物的主要过程。逆转录病毒法制备转基因动物的主要过程。胚胎干细胞的概念。胚胎干细胞制备转基因动物的流程。体细胞核移植法及其制备转基因动物的主要流程。动物器官生物反应器的概念。转基因小鼠的鉴定方法。
第十章 基因治疗
基因治疗的概念,基因治疗的基本策略,基因治疗的载体类型。单基因遗传病的基因治疗策略,肿瘤基因治疗的策略,耐药基因治疗的概念,自杀基因治疗的概念等。CAR-T的概念与优点。艾滋病基因治疗的策略等。
二、参考书目
1. 袁婺洲编著,《基因工程》,第二版。北京化学工业出版社,2019年。
2. 袁婺洲主编,《基因工程》。北京,化学工业出版。2010年。
3. 《基因工程》在线开放课程,袁婺洲、万永奇、范雄伟主讲,中国大学MOOC,爱课程网。
4. 《转基因的科学--基因工程》在线开放课程,袁婺洲、万永奇、范雄伟主讲,知到APP,智慧树网。
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